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大鼠肝大部切除后热休克处理对热休克蛋白和磷酸酶的影响

夏民 卢爱灵 李效阳 赵绪永 李永辉 徐存拴

  【摘要】 目的 研究热休克蛋白(Hsc70/Hsp68)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)在肝再生过程中的生物学作用,检测这些大分子在大鼠肝大部切除后热休克处理下的动态变化。 方法 用组织化学、免疫组织化学、Western印迹、酶的原位复性电泳、体视学分析、比色分析等方法。 结果 肝切除和热休克联合处理(PH-HS)后的0~144h恢复期间,ACP有3个高活性期(12、36和96h),AKP有2个高活性期(12和36h),Hsc70/Hsp68有2个高表达期(16和48h);PH-HS后ACP和AKP活性增强与140~180kD的酶活性增加有关。与只进行热休克(HS)(44℃,30min)处理或与只进行2/3肝切除(PH)后恢复期间Hsc70/Hsp68含量和磷酸酶活性动态变化的比较表明,PH-HS对Hsc70/Hsp68含量和磷酸酶活性的影响可持续120h;PH-HS中的PH能略微降低ACP和AKP活性,减少HS诱导肝细胞合成Hsc70/Hsp68的量;PH-HS中的HS处理能抑制PH诱导的Hsc70/Hsp68表达和推迟ACP活性高峰出现的时间。 结论 ACP、AKP和Hsc70/Hsp68均在肝细胞的HS反应和肝再生中起作用,其中,ACP可能在启动肝再生中起重要作用,AKP和Hsc70/Hsp68可能在DNA合成和细胞分裂中起重要作用。
  【关键词】 肝再生;热休克;保持性热休克蛋白70/诱导性热休克蛋白68;碱性磷酸酶;酸性磷酸酶;大鼠
  【中图分类号】 Q28 【文献标识码】 A 【文章编号】 0529-1356(2000)03-239

ANALYSIS OF THE EFFECT OF HEAT SHOCK AFTER
RAT PARTIAL EPATECTOMY ON Hsc70/Hsp68
EXPRESSION AND PHOSPHATASE ACTIVITLES

XIA Min, LU Ai-ling, LI Xiao-yang, ZHAO Xu-yong, LI Yong-hui, XU Cun-shuan
(Biology Department, Henan Normal University, Xinxiang 453002, China)

  【Abstract】 Objective  We tried to probe the biological function of ACP, AKP and Hsc70/Hsp68 in liver regeneration treated by heat shock(44℃, 30min, recover 8 hours)after 2/3 hepatectomy (PH-HS). Methods By histochemistry, immunohistochemistry, Western-blot,non-denatured electrophoresis, sterology and colorimetry, we detected the location and content of the conserved heat shock protein70/induced heat shock protein 68 and location and activity of the acid and alkaline phosphatases(ACP and AKP). Results ACP has three high activity-stages(12,36 and 96h), AKP has two high activity-stages(12 and 36h), and Hsc70/Hsp68 has two high expression-stages (12 and 48 h) during 0-144 h recovery time after PH-HS. The enhanced ACP and AKP activity comes from 140-180 kD phosphatases after PH-HS. Comparison of kinetics of Hsc70/Hsp68 content and ACP and AKP activity after PH-HS with that after heat shock(HS) treatment(44℃, 30m

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