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羟基喜树碱和topotecan对人卵巢癌细胞株体外作用的研究

孙正怡 沈铿 许秀英 郎景和

  【摘要】 目的 观察10-羟基喜树碱(羟基喜树缄)和9-二甲基氨基-10-羟基喜树缄(topotecan)对卵巢癌细胞株体外生长的影响。方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,测定羟基喜树碱和topotecan对卵巢癌细胞株SKOV3和CAOV3生长的抑制作用,并绘制浓度-抑制率曲线,观察这两种药物对SKOV3和CAOV3的生长及集落形成的抑制作用,并与顺铂进行对比;用末端脱氧核酰转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL)、DNA 梯形条带法检测药物诱导细胞凋亡的情况;免疫组化法检测药物对c-myc、bcl-2、fas基因的表达;并通过透射电镜观察应用羟基喜树碱后细胞超微结构的变化。结果 羟基喜树碱和topotecan对卵巢癌细胞株SKOV3和CAOV3的生长抑制作用呈现明显的剂量依赖性;羟基喜树碱和topotecan对SKOV3作用24小时的50%抑制浓度(IC50)分别为72 ng/ml和160 ng/ml,对CAOV3作用24小时的10%抑制浓度(IC10)分别为141 ng/ml和12 ng/ml,均明显高于顺铂(P<0.01);羟基喜树碱和topotecan对细胞株的集落形成均有明显的抑制作用,与顺铂比较,差异均有极显著性(P<0.01),且topotecan作用强于羟基喜树碱(P<0.05);5 ng/ml的羟基喜树碱和topotecan分别使SKOV3的倍增时间延长49.00倍和1.75倍,使CAOV3的倍增时间延长2.77倍和1.94倍,羟基喜树缄和topotecan明显抑制了SKOV3和CAOV3的生长(P<0.05);羟基喜树碱和topotecan均可诱导SKOV3和CAOV3凋亡,与对照组比较,差异均有显著性(P<0.05);羟基喜树碱和topotecan对SKOV3和CAOV3 的c-myc、bcl-2、fas基因表达的影响不明显(P>0.05);透射电镜观察发现,羟基喜树碱可导致SKOV3和CAOV3的细胞核、细胞器和微绒毛损伤。结论 羟基喜树碱和topotecan对卵巢癌细胞株SKOV3和CAOV3的生长有明显的抑制作用,并可诱导SKOV3和CAOV3凋亡;羟基喜树碱可以明显改变两种细胞的超微结构。
  【关键词】 喜树碱  topotecan  卵巢肿瘤

The Effect of Hydroxycamptothecin and Topotecan
to SKOV3 and CAOV3 in vitro

SUN Zhengyi, SHEN Keng, XU Xiuying, et al.
Peiking Union Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences, Peiking Union Medical College, Beijing 100730

  【Abstract】 Objective To examine the effect of hydroxycamptothecin (HCPT) and topotecan, two kinds of derivative of camptothecin, to two ovarian cancer cell lines, SKOV3 and CAOV3. Methods Methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) was used to establish the dose-effect curves. The ability of these two drugs to induce apoptosis of the two cell lines was determined by the method of terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) and DNA Ladder. The morphological changes of the cells were observed by electronic microscope. Expression of c-myc, bcl-2, and fas was estimated by the immunohistochemical staining. ResultsThe inhibition of HCPT and topotecan to the grow

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