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局灶性淋巴细胞性甲状腺炎手术治疗及其滤泡细胞凋亡与增殖状况的免疫组化分析 |
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Ki-67染色进行了滤泡细胞增殖和凋亡状况分析。
1 资料与方法
1.1 资料来源
白求恩医科大学第三临床学院普外科1995年3月至1998年10月手术治疗的局灶性甲状腺炎病人共30例。其中男性3例，女性27例。年龄29～58岁，其中18例慢性淋巴细胞性甲状腺炎均在40岁以上，且均为女性。
1.2 临床表现
病史2天至1年不等，平均3个月。均表现为局限于甲状腺一叶的单发结节，质硬，形状不规则，无疼痛。
1.3 特殊检查
30例病人中有21例进行了甲状腺功能8项检查，自身抗体滴度均未高于正常值。6例进行了ECT扫描，均为凉结节。全部病人术前进行了甲状腺超声检查，26例表现为结节部位甲状腺呈地图样低回声，其余部位甲状腺正常，4例表现为结节部位为混合性强回声，其余部位甲状腺正常，13例进行了细针穿刺细胞学检查，镜下可见大量淋巴细胞。
1.4 治疗方法
30例病人均实施单纯肿物切除术。术中见甲状腺局部呈灰白结节，周围正常，术中均经快速冰冻病理诊断为甲状腺炎，术后石腊病理证实为甲状腺炎后口服阿斯匹林每次0.3g，每日3次，左旋甲状腺素50～100μg/d，服用1个月。
1.5 随访
对30例病人进行了12～40个月的随访，每例至少复查了一次甲功8项，各项指标均正常，定期进行甲状腺超声检查，甲状腺回声正常。
1.6 实验材料
1995年3月至1998年10月在我院普外科住院手术切除的局灶性甲状腺炎标本30例；随机选择同期住院病人乳头状甲状腺癌20例；结节性甲状腺肿20例；猝死的健康男性甲状腺组织5例。
1.7 免疫组化染色
应用ZYMED公司Ki-67鼠抗人单克隆抗体，SANTA公司Bax单克隆抗体，采用LSAB法进行免疫组化染色，将切片脱蜡至水化，高温抗原修复，3%过氧化酶阻断，小牛血清封闭，一抗低温过夜，二抗、三抗常温孵育，DAB显色，苏木精复染，封片。
2 结果
2.1 判定标准
Ki-67染色胞核呈现棕色颗粒状着色判定为阳性。Bax染色核周呈黄色着色判定为阳性。应用目镜测微尺，对Ki-67染色标本进行增殖指数计算，方法是避开淋巴滤泡区域，随机选择4个高倍视野，从中选出阳性率最高的一个查出滤泡细胞总数及阳性细胞数［2］。Bax染色阳性采用五级分级法：0级<5%，1级?～25%，2级?～50%，3级?～75%，4级>75%［3］。统计学分析：根据数据类型分别采用t检验，卡方检验。
2.2 Bax染色结果
各组阳性强度明显不同，详见表1。
表1 Bax染色阳性强度
强度
分级
慢 性
甲状腺炎 亚急性
甲状腺炎 乳头状
甲状腺癌 结节性
甲状腺肿 正 常
甲状腺
0 0 0 0 0 0
1 0 0 1 3 0
2 1 2 15 17 5
3 4 4 4 0 0
4 13 6 0 0 0
局灶性慢性甲状腺炎和局灶性亚急性甲状腺炎明显高于其它各组，但两者阳性强度无明显差异(P<0.05)。
2.3 Ki-67染色结果
各组增殖指数不等，慢性甲状腺炎0.51±0.22，亚急性甲状腺炎0.39±0.20，乳头状甲状腺癌2.07±0.35，结节性甲状腺肿0.17±0.08，正常甲状腺0.20±0.11。
增殖以甲状腺癌最强，慢性甲状腺炎和亚急性甲状腺炎次之，结节性甲状腺肿和正常甲状腺组织最弱(P<0.05)。
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