抗皂角毒 表皮生长因子受体双功能抗体的制备与体外效应的研究

张尚权　严缘昌　赵　峰　杨绍华　陈小东　何　颖

　　中国图书分类号　R730.53
　　摘　要　目的：研究制备抗皂角毒和表皮生长因子受体双功能抗体，用以导向皂角毒杀伤肿瘤细胞。方法：在制备EQ75、CY12.14单克隆抗体细胞株的基础上，通过杂交-杂交瘤技术制备双功能抗体细胞株。结果：双功能抗体(EQ75×CY12.14)与单用皂角毒杀伤肿瘤细胞(A431)的IC50分别为10-9.6、10-8.4 mol/L。结论：双功能抗体(EQ75×CY12.14)杀伤肿瘤细胞(A431)，以IC50值计算，有效率为单用皂角毒的15倍左右。
　　关键词　双功能抗体　皂角毒蛋白　表皮生长因子受体

In vitro study on cytotoxicity and the preparation of anti-Saporin/anti-EGFR bispecific antibody
ZHANG Shang-Quan, YAN Yuan-Chang, ZHAO Feng et al.Shanghai Institute of Cell Biology,Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031

　　Abstract Objective:To analyses and prepare the bispecific monoclonal antibody of anti-Saporin and anti-epidermal growth factor receptor(EGFR) which can enhance the effectiveness of tumor cell killing activity.Methods:On the basis of establishing the cell lins which produce monoclonal antibody against EGFR(EQ75) and Saporin (CY12.14) hybri-hybridoma technique was used to construct the cell line of bispecific monoclonal antibody against Saporin and EGFR.Results:IC50 of the bispecific monoclonal antibody and only saporin are 10-9.6 mol/L and 10-8.4mol/L respectively in tumor-killing cell (A431).Conclusion:The effectiveness measured by IC50 which bispecific antibody(EQ75×CY12.14)tumor-killing cell(A431),is about 15 times more than that of which only saporin dose.
　　Key words Bispecific antibody Saporin Epidermal growth receptor

　　继单克隆抗体制备发展成为双功能单克隆抗体（BSAb），迄今，已在肿瘤、感染性疾病及免疫组化、检测等方面得到广泛的应用与研究。尤其在肿瘤治疗方面，国外研究甚多，国内已有肝癌、肺癌、胃癌等单克隆抗体都已进入临床试验。EGF-R单克隆抗体也得到很多研究工作者的关注，文献表明许多肿瘤表面过度表达EGF-R，如非小细胞肺癌、肝癌、胶质瘤、鳞癌、恶性表皮癌等表面过度表达的EGF-R可达1×106［1］，而一般哺乳类动物上皮细胞含量极微，并且证明EGF-R 与编码 C-erbB-2 癌基因产物同源，EGF-R和erbB-2与肿瘤的形成密切相关。
　　细胞表面EGF-R与自/旁分泌异常的配体EGF/TGF-α　结合后，促进细胞的恶性增殖和细胞的转化，过量的EGF-R单抗与EGF-R结合，可有效地竞争性地阻断EGF/TGF-α与EGF-R结合从而抑制肿瘤细胞恶性发生与发展［2］。另外，人们所熟知的某类肿瘤单克隆抗体只能针对某类肿瘤细胞表面的某种抗原决定簇，因此单一的肿瘤单抗往往因为其肿瘤抗原的调变或其肿瘤表面抗原的异质性，使肿瘤单抗导向治疗效果不十分明显，而EGF-R单抗则有效地避免了肿瘤导向治疗中的这类弊端。

1　材料

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