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不同种属钩端螺旋体疏水外膜蛋白的特征研究

张燕华 许玉堂 曹勇 戴保民

作者单位:610041 成都,华西医科大学基础医学院
钩端螺旋体病研究室(张燕华,戴保民);
成都中医药大学微生物与免疫学教研室
〔许玉堂(研究生),曹勇(研究生)〕

本课题受国家自然科学基金和卫生部留学回国人员科研启动基金资助


【 摘要 】 目的 研究钩端螺旋体外膜蛋白(Outer membrane protein,OMP)的结构
和抗原特征,对不同种属钩端螺旋体疏水外膜蛋白进行了比较研究。 方法 用Triton X-11
4(-114)抽提10株不同种属钩体疏水外膜蛋白,用不连续缓冲系统制备5%浓缩胶和12%的分
离胶,行SDS-PAGE电泳,在恒压下180V电泳5小时,考马斯亮兰G-250染色。用抗017外
膜血清、017 McAb行免疫印迹分析,对其疏水外膜蛋白的免疫特征进行比较和分析。 结果
不同种属钩体疏水OMP,均出现4-7条主要蛋白区带,并存在较大差别。致病性问号状钩体与
非致病的双曲钩体及细丝体几乎无相同的蛋白主带,而分子量为39000的蛋白主带为问号状
钩体各株共有,且各株此区带与问号状钩体017株特异性抗体出现强弱不等的免疫反应;不
同群型017株和Hond UtrechtⅣ株带型相似程度较大,而同型不同株017株(高毒)和601
株(低毒)两株有相似主带,也有各自不同的主带。 结论 不同种属钩体疏水OMP结构有较大差
异,同种、同群、同型间相似性较大,但也有明显变异。分子量为39000疏水OMP(OmpL39)
是问号状钩体共有的蛋白抗原,在筛选钩体毒力基因、保护性抗原和分类鉴定中有重要意义。

【 主题词 】 钩端螺旋体 膜蛋白 抗原性
Characterization of the hydrophobic outer membrane proteins of the di
fferent genera and sepecies of Leptospira Zhang Yanhua*,Xu Yutang,Ca
o Yong,et al. *Research Unit of Leptospira of West China University of M
edical,Chengdu 610041

【 Abstract 】 Objective To study the differences of OMPs of Lepto
spira of different genera in reference to their antigenicities and mol
ecular characteristics. Methods The outer membrane proteins of the Le
ptospira of different species have been extracted with TX-114.SDS-PAG
E was used for analyses of different OMPs.5% concentrated gel and 12% se
parating gel were prepared with discontinued buffer systems.The elec
trophoresis were done at 180V for 5 hrs,and the gels were stained with Co
omassie brilliant blue G-250. Results The structures of the hydrophobi
c OMPs of L.interrogans,L.biflexa and Leptonema illini were apparent
ly different,all the OMPs of 10 strains had 4-7 major protein bands but th
e profile patterns were not the same.All strains of L.interrogans had t
he protein of 39 kD an

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