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应用铈细胞化学方法观察镉诱发氧自由基对肾脏的损伤 |
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叶煦亭 沙继宏 汤莹 郑尊 于秉学 杨勇骥 吴越
【摘要】 目的 研究镉及其诱发的氧自由基对肾脏的急性损伤。方法 应用电镜细胞化学及能量色散谱分析技术。结果 镉离子可进入到肾近曲小管上皮细胞内。肾组织内有氧自由基的过量产生，其主要位于血管内皮细胞，肾近曲小管上皮细胞的线粒体，微绒毛及基底膜等部位。肾近曲小管上皮细胞及线粒体可发生肿胀及内皮细胞脱落等病变。结论 镉离子可导致氧自由基的大量形成，从而对肾脏造成损伤。
【关键词】 镉 自由基 肾 过氧化氢
Application of Cerium Cytochemical Method in Observation of Renal Injury Caused by Oxygen Free Radical with Cadmium Induction YE Xuting, SHA Jihong, TANG Ying, et al. Institute for Biophysics, The Second Military Medical University, Shanghai 200433
【Abstract】 Objective To study acute renal injury caused by oxygen free radical with cadmium induction. Methods Electron microscopy cytochemical and energy dispersive X-ray (EDX) analysis techniques were used. Results Cadmium ions could enter the epithelial cells of renal proximal convoluted tubules. Excessive production of oxygen free radical was found in the kidney tissues, which located mainly in the endothelial cells of blood vessels, mitochondria of epithelial cells of renal proximal convoluted tubules, microvilli and basement membrane. Swelling of epithelial cells and mitochondria and drop of epithelial cells could occur in renal proximal convoluted tubules. Conclusion It suggests that cadmium ions can induce the formation of large amount of oxygen free radical and cause renal injury.
【Key words】 Cadmium Free radicals Kidney Hydrogen peroxide
大量报道镉(Cd)离子急性损伤的第一器官为肝脏，肾脏是其慢性损伤的主要靶器官［1，2］。镉离子能诱发大量过氧化氢(H2O2)对肾脏近曲小管上皮细胞、毛细血管内皮细胞、基膜等造成损伤。蛋白质及脂质的过氧化，将导致细胞膜流动性、通透性的改变，细胞粘附力的下降，细胞内钙库线粒体的膜损伤将影响能量代谢及细胞钙离子的内稳态调节。我们应用铈（Ce）细胞化学方法［3］，对H2O2进行了细胞定位，超微结构观察及能量色散谱（EDX）分析。研究镉离子诱发的自由基对肾细胞的急性损伤作用。
材料与方法
选用正常雄性Wistar大鼠8只，体重200～250 g，共分3组。实验A、B两组各3只，腹腔注射CdCl2 10mg/kg。A组60分钟后取材并做Cd的EDX检测。B组90分钟后取材。正常对照组除未注射CdCl3外同A组。大鼠分别腹腔注射3％戊巴比妥钠麻醉后剖腹心脏插管。生理盐水灌注1分钟，冲净血液后灌注Ce生理溶液（CeCl3 1 mmo1/L）5分钟。随后2％多聚甲醛-0.1 戊二醛灌注固定5分钟。取皮质，髓质切成0.5 mm3小块，4％多聚甲醛-0.1％戊二醛继续固定4小时。漂洗后，1％锇酸固定2小时。丙酮逐级脱水，Epon 812树脂包埋。LKB超薄切片机切片，醋酸铀、柠檬酸铅常规染色。日立H800分析电镜观[1] [2] 下一页
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