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异位妊娠妇女血清沙眼衣原体及热休克蛋白60抗体的测定 |
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韦红 吴仕孝 沈犁 张友逊
生殖道沙眼衣原体(CT)感染是与妇女盆腔炎(PID)、异位妊娠(EP)有关的性病。CT感染导致输卵管损害的机理，目前还不完全清楚。近年来研究认为，衣原体相对分子质量为60000的热休克蛋白(chlamydial heat shock protein 60, C-HSP60)参与了沙眼衣原体慢性感染的免疫病理过程，与EP及输卵管性不孕症(TFI)的发病机理有密切的关系［1,2］。我们采用基因工程的方法产生C-HSP60抗原，对47例EP患者和46例宫内妊娠妇女血清中C-HSP60抗体进行测定，了解C-HSP60在EP发病中的作用。
一、资料与方法
（一）研究对象
选择1996年2月至1997年8月在重庆医科大学附属第一医院产科住院的47例EP患者（EP组），行B超、血或尿hCG测定，经保守治疗有效及经手术和病理检查证实。同时选择46例产科围产保健的孕妇做为对照组。两组的平均年龄、孕次及人工流产次数差异无显著性，两组的平均产次与平均宫腔操作史差异有显著性（P<0.05）。EP组中有4例有EP史，有3例有PID史，2例有不孕史。而对照组中无一例有以上疾病史。采集EP组患者治疗前及对照组妇女肘静脉血，收集血清-20℃保存待测。
（二）方法
1．重组C-HSP60克隆、纯化及应用： C-HSP60具有高度保守性，在各血清型之间无差异。以沙眼衣原体F型的基因组DNA为模板，经聚合酶链反应（PCR）扩增C-HSP60基因后将PCR产物克隆到T7启动子驱动的表达载体PGEMYX5中。将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α中，进行测定证实序列无误后，重组质粒转化到大肠杆菌中表达重组蛋白。重组C-HSP60在天然状态下，通过金属鏊合的层析柱纯化。将纯化的C-HSP60融合蛋白作为抗原，包被于酶标板上，用间接法测定血清抗体。
2．CT特异性IgG、IgM抗体测定：取出待测血清，实验步骤和操作技术按CT(IgG,IgM) 酶联免疫试剂盒(购自深圳晶美公司)操作步骤进行。
3．统计学分析：计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验。
二、结果
1．CT特异性IgG、IgM检测： EP组血清CT IgG阳性率明显高于对照组，差异有显著性（P<0.05）。EP组CT IgG阳性患者中，仅2例有PID史。EP组血清CT IgM阳性率与对照组的阳性率比较，差异无显著性(P>0.05)。见表1。
表1 两组患者CT IgG、IgM及C-HSP60 IgG、IgM抗体检测结果
组别 总例数 CT IgG CT IgM C-HSP60 IgG C-HSP60 IgM
例数 百分比
（%） 例数 百分比
（%） 例数 百分比
（%） 例数 百分比
（%）
EP组 47 32 68.1* 5 10.6 12 25.5* 6 12.8
对照组 46 16 34.8 4 8.7 2 4.3 1 2.2
* 与对照组比较，P<0.05
2．C-HSP60特异性IgG、IgM检测： EP组血清C-HSP60 IgG阳性率明显高于对照组(P<0.05)。EP组CT IgG阳性患者中C-HSP60 IgG阳性率为34.4％,而对照组无一例阳性，两组差异有显著性（P<0.05），EP组与对照组血清C-HSP60 IgM阳性率差异无显著性(P>0.05)。见表1。
三、讨论
1．生殖道CT感染与异位妊娠：本研究将CT IgG抗体作为既往CT感染的证据之一，测定EP患者CT IgG抗体阳性率为68.1％，显著高于对照组。说明，生殖道CT既往感染是我国发生EP的重要原因。临床上仅2例EP患者有明确的PID史。在未发现有急性PID史而又发生EP的患者中，93.8％的血清有CT IgG抗体存在，提示CT亚临床型输卵管炎是既往CT感染的主要形式。CT感染次数增加，EP发生的危险也随之增加。本研究中，EP患者皆未作过有关CT方面的实验室检查和相应治疗，因此，临床上必须高度重视CT感染。本研究发现，EP发生的危险因素有产次、宫腔操作史，这些因素改变了生殖道的生理条件，削弱了局部防御功能，增加了CT感染的机会，易引起输卵管损害，导致一系列后遗症的发生。
2．C-HSP60与异[1] [2] 下一页
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