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银屑病患者血清可溶性肿瘤坏死因子受体水平的检测

更新时间:2012-10-15 14:46:29  
张开明 刘梅青 尹兴平 杨小英

  由于肿瘤坏死因子(TNF)α在银屑病发病中具有重要的作用[1,2],故推测可溶性TNF受体(sTNFR)在银屑病发病中可能也有一定的意义。为此,我们检测了银屑病患者血清中sTNFRⅠ与sTNFRⅡ水平,现将结果报道如下。
  一、对象与方法
  1.对象:为1996年9月~1997年5月门诊及住院的寻常性银屑病患者,共
  作者单位:030009 太原市中心医院皮肤科
57例,年龄平均38岁,其中男33例,女24例。57例中进行期和静止期银屑病患者分别为28例和29例,皮损程度计算按照PASI积分法(积分均数为32.6)。对照组56例,平均37岁,均为健康者。
  2.方法:sTNFRⅠ与sTNFRⅡ试剂盒为比利时Medgenix公司产品。抽出被检测者静脉血2 ml分离血清,-40℃备用待测,所有样品的sTNFRⅠ与sTNFRⅡ均是一次同步测定,采用双抗体夹心ELISA法,主要步骤为:将sTNFRⅠ及sTNFRⅡ标准品、待测血清及空白(生理盐水)加入已包被的96孔酶板中,每孔50 μι,均为复孔,再加入辣根过氧化物酶标记的羊抗人sTNFRⅠ(或sTNFRⅡ)单克隆抗体,每孔200 μι,室温振荡(700r/min)孵育l小时,弃去孔内液体,用0.01 mol pH7.4磷酸盐缓冲液(每次每孔400 μι)洗涤3次,然后加入显色液,每孔50 μι,室温振荡孵育15分钟,最后每孔加入200 μι0.15 mol H2SO4终止反应,置全自动酶标仪450 nm和650 nm(双波长法)处测吸光度(A)值,用标准品А值(复孔均值)及浓度绘制标准曲线,从中求得样品中 sTNFRⅠ与sTNFRⅡ实际含量,单位:ng/ml。
  3.统计处理:将上述复孔均值数据输入电脑,采用SPSS软件包进行两样本均数t检验及相关分析。
  二、结果
  1.sTNFRⅠ及sTNFRⅡ水平:银屑病患者血清中sTNFRⅠ与sTNFRⅡ水平比对照组明显增高,见附表。进行期与静止期患者血清中 sTNFRⅠ分别为2.2±1.4及2.1±1.3(ng/ml),t=1.36,P>0.05;sTNFRⅡ分别为8±6及8±6(ng/ml),t=1.27,P>0.05。

附表 两组对象血清sTNFRⅠ与
  sTNFRⅡ水平(ng/ml,±s)


组别 例数 sTNFRⅠ sTNFRⅡ
银屑病组 57 2.2±1.4 7.9±6.1
对照组 56 1.3±0.7 4.3±1.7
t值   1.96 2.32
P值   <0.05 <0.02

  2.相关分析:sTNFRⅠ与sTNFRⅡ经相关分析,银屑病患者组r=0.81,P<0.001,正常对照组r=0.50,P<0.02。sTNFRⅡ与皮损程度相关分析为,r=0.36,P<0.05。sTNFRⅠ与皮损程度相关分析为,r=0.29,P>0.05。
  三、讨论
  因TNFα与银屑病发病密切相关,而TNFα的效应必须通过TNFR才可产生,所以研究sTNFR对于了解银屑病发病机理非常重要。本实验显示:(1) 银屑病患者血清中sTNFRⅠ与sTNFRⅡ水平明显增高,sTNFRⅡ又明显高于sTNFRⅠ水平。表明,sTNFR在银屑病发病机理中有一定的作用;(2) 相关分析表明,sTNFRⅠ与sTNFRⅡ在正常人及银屑病组均具有正相关关系,两组内sTNFRⅡ含量均高于sTNFRⅠ,提示,银屑病患者产生sTNFRⅠ与sTNFRⅡ能力虽然增高,但其产生sTNFR的规律却无明显异常改变。本结果还显示,sTNFRⅡ与皮损程度有一定的平行关系;(3) 进行期与静止期患者血清sTNFRⅠ与sTNFRⅡ比较差异无显著意义。最近Griffiths等[3]观察到银屑病皮损中TNFRⅠ浓度比正常对照组明显增高,与临床严重程度相关;而Bonifati等[4]认为TNFRⅠ主要在正常皮肤的成纤维细胞的核及核质中表达,在银屑病皮损表达明显减少。由于sTNFR和TNFα的作用均是双重性,两者作用相互依赖,故深入了解银屑病患者血清中sTNFR/TNF

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